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I 离心机的相关知识介绍
离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离,而沉降速度取决于颗粒的质量、大小和密度。
● 相对离心力(RCF)
又称为(g)力是在离心过程中实际施加在样品上的作用力。
RCF=1.18x离心半径(mm)x(转速/1000)2
在离心过程中能够直接设定离心力离心,可以使结果更加准确、可靠,更具有科学性。
● 转速(rpm)
通常以每分钟多少转来表示。相对离心力与转子转速的平方成正比。因此,转速是决定离心力的主要因素。
● 离心半径
指转子中轴到样品管中心的距离,离心半径与离心力成正比。不同的转子具有不同的离心半径。不同厂家相同容量的离心机转子半径不同,相同的转速所得到的离心力也不同,
对RCF会产生很大影响。
综上所述:转速、离心半径均对离心力产生较大影响,在实际使用过程中,能够直接设定离心力,就可以把影响降到zui小。
II 离心效果
● 离心积分
相对离心力和离心时间是决定离心效果的关键因素。但无法仅用这两个参数来准确衡量离心效果。上*使用离心积分(HRF)来衡量离心效果。
离心积分是指离心过程中离心力对离心时间的积分。离心积分考虑了离心过程中各种影响因素对离心加速的影响,保证施加于样品的离心力总量一致,从而保证一致的离心效果。离心积分还表明:短时间的高速离心和长时间的低速离心可以获得相同的离心效果。
● 差速离心(differential centrifugation )
差速离心法是利用样品中各种组分的沉降系数不同而进行分离的方法,又称差分离心或差级离心。通常两个组分的沉降系数差在10倍以上时可以用此法分离。在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、zui后为核蛋白体。沉降系数差别在一个或几个数量级的颗粒,可以用此法分离
差速离心首先要选择好颗粒沉降所需的离心力和离心时间,应用方式与学科:
1:分步改变离心速度,用不同强度的离心力使具有不同密度的物质分批分离的方法。
应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);方法与技术(二级学科)
2:利用不同物质沉降速率的差异,在不同离心速度下分离和收集不同颗粒的离心技术。常用于分离细胞匀浆中的各种细胞器。
应用学科:细胞生物学(一级学科);细胞生物学技术(二级学科)
差速离心法的优点是样品的处理量较大,用于大量样品的初分离,可使用容量较大的转子
III 安全离心
操作者的安全防护
样品与转子在高速离心状态下会产生巨大的离心力,因此对使用者的安全保护是离心机设计的首要因素。
● 需用高强度材料
【1】 环氧涂层钢制材料:抵抗各种溶剂和碎片的侵蚀。
【2】 钢制结构,不锈钢腔:高强度,抗腐蚀
【3】 盔甲电镀:当转子或吊桶碎裂是,能够起到保护腔体作用
● 不平衡保护,不平衡时自动停机,自动失衡识别。
● 转子自动识别【高速离心机】,超速保护。防止使用者误操作导致危险的发生
● 自动平衡,无需配平
● 保证转子高速运转时突然发生轴断裂时:
【1】 转子不会飞出
【2】 离心力外表看不成变形
【3】 断电后能正常开盖
【4】 内腔体变形不超过:3mm
【5】 离心机在试验台上不发生水平位移
● 使用者需与离心机保持至少30cm的安全距离
● 温度控制,保证生物样品活性
离心常见的温度设定为:4℃,20, 37℃ ,其中以4℃(生物零度)zui为重要,这就要求离心机具备预制冷功能、定温启动功能,保证样品一放入就处于安全温度下离心。
Ⅳ 舒适离心
低噪音设计:
通常离心机噪音范围为55—70dBA;
65dBA为可接受的噪音水平
<60dBA为较好的噪音水平
每增加3dBA相当于增加一倍的噪音效果